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发布时间:2022-03-31 15:19:42 作者:知网小编 来源:www.it54.cn
荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、 试剂 和技术的发展。 近期,尤其是08年以来,仪器和试剂是遍地开花,这也使科研人员均跃跃欲试,都想借此技术使自己的研究能突飞猛进,发展势头通过查找每年所发表的文章数可一目了然。
荧光定量PCR的应用 分子生物学研究 1 核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等。 2 基因表达差异分析。
答: 每个基因序列长短不一,有的好几kb,有的几百bp,但是我们在设计引物的时候只需要要求产物长度80-300bp,太短或者太长都不适合做荧光定量PCR检测。 产物片段太短,无法跟引物二聚体区分,引物二聚体的长度大概在30-40bp,小于80bp很难区分是引物二聚体还是产物。
Real-time-PCR和 qPCR (Quantitative Rea-ltime-PCR )是一码事,都是实时定量PCR,指的是PCR过程中每个循环都有数据的实时记录,因此可以对起始模板数量进行精确的分析。 虽然Real-time PCR(实时荧光定量PCR)和 Reverse transcription PCR(反转录PCR)看起来都可以缩写为RT-PCR,但是,国际上的约定俗成的是: RT-PCR特指反转录PCR , 而Real-time PCR一般缩写为 qPCR(quantitative real-time PCR)。